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SOP用于制備微生物培養(yǎng)基

1.0目標(biāo)

制定微生物培養(yǎng)基,平板和斜面的制備程序。

2.0范圍

此SOP適用于質(zhì)量控制部門。

3.0責(zé)任

微生物學(xué)家

4.0問責(zé)制

品管部主管。

5.0程序

5.1要求

5.1.1天平
5.1.2脫水介質(zhì)
5.1.3高壓滅菌器
5.1.4層流氣流
5.1.5玻璃器皿

5.2培養(yǎng)基的準(zhǔn)備(使用脫水培養(yǎng)基)

5.2.1將脫水后的介質(zhì)黑暗包裝或按照制造商的指示密封包裝。
5.2.2稱取所需量的脫水培養(yǎng)基,然后將其加入裝有純凈水的燒瓶中。
5.2.3用純凈水補(bǔ)足所需的體積。
5.2.4在滅菌前和滅菌后檢查培養(yǎng)基的pH值,如果需要,請按照相應(yīng)培養(yǎng)基容器中所述的HCl或NaOH溶液,按照相應(yīng)培養(yǎng)基容器中所述調(diào)整pH值。
5.2.5根據(jù)需要將介質(zhì)分配到燒瓶或試管中。
5.2.6用耐高溫高壓塑料蓋/棉塞蓋住燒瓶和試管,并用黃油紙/鋁箔紙包裹。按照步驟中提到的步驟加載材料高壓滅菌器操作的SOP。
5.2.7除非另有說明,否則可通過在15磅壓力下于121°C高壓滅菌15分鐘來滅菌介質(zhì)。
5.2.8在“媒體準(zhǔn)備注冊”中輸入準(zhǔn)備好的媒體的詳細(xì)信息。
5.2.9還要在SOP(高壓滅菌器的操作)的高壓滅菌器滅菌記錄中進(jìn)行相關(guān)輸入。
5.2.10將培養(yǎng)基在30至35°C的溫度下預(yù)孵育48小時。
5.2.11如果是液體培養(yǎng)基,則目視檢查是否有渾濁形式的增長;如果是固體瓊脂,則目視檢查是否存在濁度的增長。如果發(fā)現(xiàn)有任何增長,請丟棄介質(zhì)。
5.2.12對每份滅菌培養(yǎng)基進(jìn)行陽性對照試驗(yàn)。
5.2.13在低于25°C的溫度下預(yù)溫育15天后,將制備的無菌固體瓊脂和液體培養(yǎng)基保存。

5.3傾盤的準(zhǔn)備

5.3.1給培養(yǎng)基補(bǔ)水并按照培養(yǎng)基準(zhǔn)備說明進(jìn)行滅菌。
5.3.2將介質(zhì)冷卻至45°以下,并在無菌條件下將15 – 20 ml倒入無菌Petri板(直徑9至10 cm)中。培養(yǎng)皿的底部應(yīng)標(biāo)有培養(yǎng)基名稱的詳細(xì)信息,批號。和準(zhǔn)備日期。
5.3.2凝固并翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)皿。將板在30°C至35°C下孵育48小時。
5.3.4目視檢查是否有污染。如有必要,丟棄。

5.4斜and的準(zhǔn)備

5.4.1給培養(yǎng)基補(bǔ)水后,溶解瓊脂培養(yǎng)基。
5.4.2在18 x 150毫米試管中分配約10毫升。用不吸水的棉花塞住試管,并用黃油紙覆蓋。
5.4.3按照標(biāo)簽上的培養(yǎng)基準(zhǔn)備說明進(jìn)行滅菌。
5.4.4從高壓滅菌器中取出試管并將其置于傾斜位置以使其傾斜,然后將試管放置在用于Butts的試管架中。
5.4.5確保傾斜的頂部不接觸棉塞并使其凝固。
5.4.6在適當(dāng)?shù)臏囟认骂A(yù)孵育48小時。
5.4.7目視檢查是否有污染。如有必要,丟棄。
5.4.8在試管上適當(dāng)標(biāo)記介質(zhì)名稱,批號和制備日期。
5.4.9在低于25°C的溫度下進(jìn)行預(yù)孵育后,請保存斜面。

5.5準(zhǔn)備RODAC板

5.5.1給培養(yǎng)基補(bǔ)水并按照培養(yǎng)基制備說明進(jìn)行滅菌。
5.5.2冷卻培養(yǎng)基,并在無菌條件下倒入無菌RODAC板中。RODAC板的底部應(yīng)標(biāo)明介質(zhì)名稱,批號,制備日期等詳細(xì)信息。

5.6培養(yǎng)基/滅菌負(fù)荷號的可追溯性

5.6.1每批準(zhǔn)備和滅菌的培養(yǎng)基都分配有一個特定的批號,為8個字符,如下所示。
XX-YYZZM
XX:表示序列號 所準(zhǔn)備媒體的
格式Y(jié)Y:表示月份
ZZ:表示年份
M:表示媒體的縮寫。
5.6.2所有準(zhǔn)備/滅菌的培養(yǎng)基批次應(yīng)按月順序編號。在分析數(shù)據(jù)表中記錄
用于微生物檢測的培養(yǎng)基名稱和所有培養(yǎng)基的特定批號。
5.6.3陽性對照
枯草芽孢桿菌NCIM 2063(或等效物)的
微生物白色念珠菌NCIM 3471(或等效物)
對于差異培養(yǎng)基和選擇性培養(yǎng)基,應(yīng)在容器上用濃度小于100 cfu / ml的培養(yǎng)基分別接種微生物。

6.0縮寫

6.1 HCl:鹽酸
6.2 NaOH:氫氧化鈉
6.3 QC:質(zhì)量控制
6.4 IPA:異丙醇
6.5 NCIM:G家工業(yè)微生物集合
6.6部門:部門
6.7 SOP:標(biāo)準(zhǔn)操作程序

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